生物工程是一門新型的跨學科技術,它涉及範圍十分廣泛,科學家通常把基因工程、細胞工程、酶工程和發酵工程,看成是構成生物工程的4大生物技術。
基因工程主要指基因重組技術。它是根據生物遺傳(chuan) 規律,使用類似工程設計的方法,在體(ti) 外利用限製性內(nei) 切酶把來自不同生物的遺傳(chuan) 基因進行“拚接”,使之重新組合。然後通過基因轉移載體(ti) 如質粒或病毒等,把重組基因轉入受體(ti) 細胞,進行無性繁殖,並使新的基因在受體(ti) 細胞內(nei) 表達,從(cong) 而生產(chan) 出人類需要的物質或創造出新的生命類型與(yu) 生物品種來。

細胞工程是指應用現代細胞生物學、發育生物學、遺傳(chuan) 學和分子生物學的理論與(yu) 方法,按照人們(men) 的需要和設計,在細胞水平上的遺傳(chuan) 操作,重組細胞結構和內(nei) 含物,以改變生物的結構和功能,即通過細胞融合、核質移植、染色體(ti) 或基因移植以及組織和細胞培養(yang) 等方法,快速繁殖和培養(yang) 出人們(men) 所需要的新物種的生物工程技術。
細胞工程與(yu) 基因工程一起代表著生物技術發展前沿,伴隨著試管植物、試管動物、轉基因生物反應器等相繼問世,細胞工程在生命科學、農(nong) 業(ye) 、醫藥、食品、環境保護等領域發揮著越來越重要的作用。

基因工程和細胞工程相關(guan) 科研實驗中,經常需要分離核酸、蛋白質、核糖體(ti) 亞(ya) 基及其它成分;在疾病預防及控製領域,經常需要純化病毒,諸如此類的實驗離不開使用密度梯度離心(density gradient centrifugation)。
密度梯度離心是用一定的介質在離心管內(nei) 形成一連續或不連續的密度梯度,將細胞混懸液或勻漿置於(yu) 介質的頂部,通過重力或離心力場的作用使細胞分層、分離。這類分離又可分為(wei) 速度沉降和等密度沉降平衡兩(liang) 種。密度梯度離心常用的介質為(wei) 氯化銫,蔗糖和多聚蔗糖。
差速區帶離心法:此法與(yu) 顆粒的密度無關(guan) ,大小相同,密度不同的顆粒(如線粒體(ti) ,溶酶體(ti) 等)不能用此法分離,僅(jin) 用於(yu) 分離有一定沉降係數差的顆粒(20% 的沉降係數差或更少)或分子量相差3倍的蛋白質, 等密度區帶離心法。
梯度介質通常用蔗糖溶液,其大折射率(密度)和濃度可達1.44193(密度1.28g/cm3)和 60%。
等密度離心法:它的分離效率取決(jue) 於(yu) 樣品顆粒的浮力密度差,密度差越大,分離效果越好,與(yu) 顆粒大小和形狀無關(guan) ,但大小和形狀決(jue) 定著達到平衡的速度、時間和區帶寬度。
梯度介質通常為(wei) 氯化銫CSCl,其大折射率(密度)和濃度可達1.39943(密度1.699g/cm3)和 56%。此法可分離核酸、亞(ya) 細胞器等,也可以分離複合蛋白質,但簡單蛋白質不適用。

無論是使用蔗糖溶液,氯化銫溶液還是其它作為(wei) 梯度介質,其預製以及離心分離後目標物質的確認都離不開折射率或者濃度測量。同時,用於(yu) 分離的樣品量通常都很小,而且目標物質層還需要收集供下一步實驗。這就要求檢測該折射率或濃度時,所需的樣品量也是越少越好。
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